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您的位置：網(wǎng)站首頁(yè) > 新聞中心 > 行業(yè)資訊 > 正文變性聚丙烯酰胺凝膠電泳與非變性的區(qū)別
我們知道變性聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）是根據(jù)寡核苷酸的大小來(lái)分離，因此可將全長(zhǎng)產(chǎn)物與不完整的短分子分開。電泳時(shí)通常每一泳道至少加1mg合成的寡核苷酸，電泳后在紫外燈下定位寡核苷酸條帶，將長(zhǎng)度正確的寡核苷酸從凝膠上切下。原理：蛋白質(zhì)或多肽與SDS結(jié)合，經(jīng)熱變性和二硫鍵的還原，形成所帶負(fù)電荷相對(duì)一致的非折疊衍生物，其泳動(dòng)速度主要由分子量決定。
而非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳(Native-PAGE)或稱為活性電泳是在不加入SDS 和疏基乙醇等變性劑的條件下，對(duì)保持活性的蛋白質(zhì)進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳，常用于酶的鑒定、同工酶分析和提純。未加SDS的天然聚丙烯酰胺凝膠電泳可以使生物大分子在電泳過(guò)程中保持其天然的形狀和電荷，它們的分離是依據(jù)其電泳遷移率的不同和凝膠的分子篩作用，因而可以得到較高的分辨率，尤其是在電泳分離后仍能保持蛋白質(zhì)和酶等生物大分子的生物活性，對(duì)于生物大分子的鑒定有重要意義，其方法是在凝膠上進(jìn)行兩份相同樣品的電泳，電泳后將凝膠切成兩半，一半用于活性染色，對(duì)某個(gè)特定的生物大分子進(jìn)行鑒定，另一半用于所有樣品的染色，以分析樣品中各種生物大分子的種類和含量。
變性聚丙烯酰胺凝膠電泳與非變性聚丙烯酰胺凝膠的區(qū)別是非變性凝膠里面沒加變性劑，一般是SDS。非變性膠跑出來(lái)的蛋白能保持其活性一般用做功能試驗(yàn)，如EMSA。由于沒有變性劑的原因非變性膠電泳時(shí)除了與蛋白分子量有關(guān)也會(huì)受都電荷的影響，因此對(duì)蛋白等電點(diǎn)的確定和緩沖液的酸堿性有注意，有時(shí)需要倒轉(zhuǎn)電泳時(shí)的正負(fù)極。從跑的膠來(lái)看，變性膠會(huì)比較好看，帶比較窄，非變性膠跑出來(lái)則比較粗糙。
文章作者：新鄉(xiāng)市聚創(chuàng)化工有限公司
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